Czynnik XI Niedobór aszkenazyjskich Żydów w Izraelu cd

Frakcję przelotową, która zawiera czynnik XI, zebrano i dializowano wobec 20 mM buforu TRIS-chlorowodorek (pH 7,2) zawierającego 0,2 M chlorek sodu i chromatografowano na kolumnie z heparyną-agarozą. Czynnik XI eluowano buforem o wysokiej sile jonowej (20 mM bufor chlorowodorku TRIS, pH 7,2, zawierający 0,6 M chlorek sodu). Częściowo oczyszczony preparat czynnika XI zatężono i odsalono w aparacie Micro-ProDicon (Bio-Molecular Dynamics). Częściowo oczyszczony czynnik XI analizowano za pomocą elektroforezy w żelu sodowym z dodecylosiarczanem-poliakryloamidem, przeprowadzonej zgodnie z metodą Laemmli.15. Białka przenoszono na błonę nitrocelulozową, jak opisano w Towbin i in. 16 Ludzki czynnik XI wykrywano za pomocą stałego enzymu. -związany test immunoabsorpcyjny z użyciem króliczego czynnika przeciwludzkiego XI (0,5 fig na mililitr), biotynylowanej koziej-antirabbitowej IgG (Bethesda Research Laboratories) i koniugatu streptawidyna-fosfataza alkaliczna do wizualizacji pasmowej.
Wyniki
Względna częstotliwość genotypów u pacjentów z niedoborem czynnika XI
Rysunek 1. Ryc. 1. Rodowody czterech żydowskich rodzin aszkenazyjskich, ukazujące różnorodność genotypów związanych z niedoborem czynnika XI. Liczby poniżej symboli oznaczają czynnik XI: poziomy C (jako procent normalnej aktywności). Rodzina miała trzy homozygotyczne potomstwo typu III / III heterozygoty związanej z typem II / III (matka) i heterozygoty typu III / – (ojciec). Członkowie rodziny 2 razem mieli wiele kombinacji zmutowanych lub normalnych genów czynnika XI możliwych u potomstwa matki II typu -heterozygotycznej i ojca heterozygotycznego typu III. Członkowie rodziny 3 mieli tylko mutację typu III. Rodzina 4 miała proband z ciężkim niedoborem czynnika XI, u którego jeden allel z mutacją typu II został odziedziczony po matce; inny zmutowany allel, odziedziczony po ojcu, nie został zidentyfikowany. Jego siostra, która miała częściowy niedobór czynnika XI, była heterozygotycznym nosicielem niezidentyfikowanej mutacji.
Analizy genotypowe przeprowadzono dla 46 niepowiązanych probandów z Izraela z ciężkim niedoborem czynnika XI. Czterdziestu trzech z tych pacjentów było pochodzenia żydowskiego aszkenazyjskiego, jeden był Arabem, a dwa byli pochodzenia żydowskiego w Iraku. Spośród 86 wadliwych genów wśród żydowskich pacjentów aszkenazyjskich 42 geny zawierały mutacje typu II, 40 zawierało mutacje typu III, miało mutację Osaka-1 (patrz poniżej), a 3 zawierało niezidentyfikowane mutacje. Nie zaobserwowano mutacji typu I. Częstotliwość wadliwych alleli typu II i typu III wynosiła odpowiednio 49 procent i 47 procent. Odsetek homozygot typu II / II do heterozygotów typu II / III i homozygot typu III / III wynosił 10:20:10. Trzej żydowscy pacjenci aszkenazyjscy byli złożonymi heterozygotami, z których każdy nosił jeden niezidentyfikowany wadliwy gen. U dwóch z tych trzech pacjentów drugi allel nosił mutację typu II, a u trzeciego pacjenta drugi allel zawierał mutację nonsensowną identyczną z tą znalezioną u japońskiego pacjenta (Osaka-I) (dane niepublikowane). Spośród 58 zdrowych kontrolnych Żydów aszkenazyjskich 2 zidentyfikowano jako heterozygotyczne pod względem mutacji typu II
[podobne: zasłużony honorowy dawca krwi leki, niedoczynność tarczycy u mężczyzn, dermatologia estetyczna warszawa ]